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Les longueurs d'ondes des lasers sont de (351-364)nm; 488 nm et 632nm.
Par conséquent, toutes les fluorochromes utilisables doivent avoir une longueur d'onde d'excitation compatible avec ces raies, et une fluorescence d'émission détectable avec les filtres disponibles
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Afin de visualiser les spectres visitez le
Spectrum Viewer de BD ou Spectra Viewer d'Invitrogen
Pour pouvoir utiliser simultanément deux fluorochromes ou plus, leurs spectres d'émission doivent chevaucher le moins possible.
Quelques fluorochromes utilisables (juste à titre d'exemple, ceci n'est pas une liste exhaustive)
| FL1 |
fluorescein isothiocyanate
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FITC |
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green fluorescent protein
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GFP |
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| FL2 |
R-phycoerythrin
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PE |
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propidium iodide
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PI |
| FL3 |
PE-Cyanin 5 tandem
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PE-Cy5 |
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Peridinin chlorophyll protein
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PerCP
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| FL5 |
allophycocyanin |
APC |
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Alexa 647 |
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Lors de choix de fluorochromes pour l'utilisation concomitante, il faut songer à associer le fluorochrome dont l'efficacité quantique est maximale au marqueur dont l'expression est relativement faible
Les exemples d'utilisation de simple, double ou triple marquage:
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Perron et al, J Biol Chem. 2003; 278: 27956
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Laberge et al, Biol Reprod 2005; 73: 289
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Yamada et al, Br J Haematol 2001. 113: 153
Bohmer et al, Br J Haematol. 1998 103: 351
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